热点聚焦PCR实验

……PCR（PolymeraseChainReaction）即聚合酶链式反应，是指在DNA聚合酶催化下，以母链DNA为模板，以特定引物为延伸起点，通过变性、退火、延伸等步骤，体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程。是一项DNA体外合成放大技术，能快速特异地在体外扩增任何目的DNA。

PCR过程分为三步

……（90℃～96℃）：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA

……（60℃～65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。

……（70℃～75℃）：在Taq酶（在72℃左右，活性最佳）的作用下，以dNTP为原料，从引物的3′端开始以从5′→3′端的方向延伸，合成与模板互补的DNA链。

……每一循环经过变性、退火和延伸，DNA含量即增加一倍,现在有些PCR因为扩增区很短，即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的时间内复制完成，因此可以改为两步法，即退火和延伸同时在60℃-65℃间进行，以减少一次升降温过程，提高了反应速度。

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