逆转录cDNA的实验准备

实验耗材：RNasefree的手套、枪头、枪头盒和1.5mlEP管（或8连管），EP管架，口罩，冰盒或冰，计时器

实验试剂：RNasefree水，逆转录试剂盒

实验仪器：移液枪，恒温加热器（或PCR扩增仪）

1、实验前先用70%乙醇擦一下实验台，有条件的实验室可在超净台或通风橱里进行；

2、整个过程尽量在冰上操作；

3、根据选用的逆转录试剂盒来选取耗材和实验仪器：

Takara(Cat.#:RRA)--1.5mlEP管--恒温加热器

Thermo(Cat.#:K)--8连管--PCR扩增仪

[每周一问]

建议用多少量的总RNA进行逆转录？

欢迎大家留言，答案下周公布~

上周问题：

下图为抽提RNA时到加完氯仿离心后的样本，分为三层，这三层分别是？

答案解析：

加入氯仿离心后，样品被分为水层和有机层：收集水相，其中的RNA可通过异丙醇沉淀收集；去除水相后，中间层的DNA可通过乙醇沉淀收集；在有机相中加入异丙醇能够使蛋白沉淀。