一种新的可显著降低对虾白斑综合征死亡率的

二十年来，白斑综合征病毒（WhiteSpotSyndromeVirus，WSSV）被认为是影响对虾养殖业的最重要病毒性病原。该病毒毒力强，宿主范围广，出现于世界上所有的对虾主产国，且在对虾出现临床症状后3-7天内可致高达00%的死亡率，给对虾养殖业带来了严重的经济损失。据估计，自白斑病出现以来，给对虾养殖造成累计80-50亿美元的损失，并以每年0亿美元的速度递增。虽然无脊椎动物没有适应性免疫系统，但有证据显示，其中一些无脊椎动物例如对虾可能具有病原特异性的“免疫致敏”（immunepriming）现象。例如暴露在灭活的WSSV病毒颗粒中可给对虾提供对该病毒的短期保护。因此，从理论上来讲，通过疫苗来预防对虾白斑综合征是可行的。事实上，研究者们已经开展了大量的相关实验。其中，将病毒抗原蛋白（肽）融合表达并锚定在微生物表面的表面展示技术因无需细胞培养病毒来制备疫苗和集表达、纯化于一体而受到不少研究者的青睐。最近，科学家报道了一种以此技术研制的、可在实验条件下显著降低对虾白斑综合征的疫苗：G.Solís-Lucero等设计了一对特异性引物，将WSSV的VP28基因序列扩增后插入到pG8SAET噬菌粒载体中。用此pG8SAET-VP28载体电转化大肠杆菌（Escherichiacoli）TG并挑取阳性转化子测序验证。采用M3K07辅助噬菌体感染上述重组大肠杆菌，大肠杆菌增殖并因噬菌体裂解后，从培养基中沉淀获得纯化的M3-VP28噬菌体。经ELISA验证，此噬菌体的外壳蛋白上表达有WSSV的VP28融合多肽，可作为针对WSSVVP28蛋白的疫苗进行免疫保护实验。实验中，给每尾南美白对虾（Litopenaeusvannamei）肌内注射2×08pfu的M3-VP28噬菌体，两天后进行肌内注射攻毒，然后连续5天，每天两次观察对虾死亡情况。经统计，攻毒后接种疫苗组累计死亡率为36.67%，显著低于接种空M3噬菌体的累计死亡率（66.67%）；而仅注射缓冲液的未攻毒组，30尾虾中仅有尾在第一天可能因应激而死亡（见下图）。另有文献报道，利用枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）芽孢及杆状病毒（Baculovirus）对VP28抗原进行表面展示来制备的口服疫苗都赋予了对虾抗WSSV的良好效果，同时酵母表面展示的口服疫苗效果也在研究之中。可见，微生物表面展示技术可成功用于疫苗表达，预防白斑综合征，在对虾养殖中具有广阔的应用前景。参考文献.Solís-LuceroG,ManoutcharianK,Hernández-LópezJ,etal.Injectedphage-displayed-VP28vaccinereducesshrimpLitopenaeusvannamei,mortalitybywhitespotsyndromevirusinfection.FishShellfishImmunology,,55:40-.2.VerbruggenB,BickleyLK,vanAerleR,etal.MolecularMechanismsofWhiteSpotSyndromeVirusInfectionandPerspectivesonTreatments.Viruses.,8():23.作者：水产动物疾病防控国家工程实验室敬小兵

对虾白斑综合症症状、养殖虾厌食，摄食减少或停止摄食，死虾空胃。行动迟钝，弹跳无力，静卧不动或游动异常(围着他边在水面兜圈或在水中翻滚)，这种行为上异常行为可在几小时内重复出现，直到最后无力活动，腹面朝上慢慢沉到水底，或被其他对虾吃掉。2、患病的对虾在胸腹部常有白色或暗蓝色的斑点，使整个虾体在外观上呈现一种花斑样改变。而患病的斑节对虾在濒临死亡时则显示出明显变蓝的现象，并多伴有腹部肌肉混浊。一些幸存的对虾可缓慢恢复正常。个别虾可在甲壳、鳃部的表皮下出现大量黑色素斑点。3、发病后期虾体皮下、甲壳及附肢出现白色斑点。甲壳软化也较常见，头胸甲易剥离，壳与真皮分离。肝胰腺呈棕黄色且易碎。发病的对虾活力下降，应激性下降，病害呈暴发性，死亡率高，因此称为暴发性白斑病。发病原因．清池不彻底。特别是养虾老池或养鱼池，底泥较多，以后则随水温升高而引发。2．虾苗自身携带病毒。在池水恶化及病菌侵袭时而引发致病3．投饵不足或投喂劣质饵料。对虾长期处于饥饿状态，营养不良，导致体质较差，免疫力下降，诱发细菌及病毒病。4.水源不足或池塘渗漏，使池水处于长期老化或不稳定状态，甚至消毒不及时，而导致发病。5.放苗密度过大，致使发病快，传染率高。病毒性白斑：病虾胃空，头胸甲和腹甲易剥离，甲壳剥离后对着光线看可见白斑（与细菌性白斑不同），体表粘附污物。处理方案)选择大型的育苗场,不选带病毒虾苗。2)停料或减少投喂。3)多开动增氧机,保证水体溶解氧在5mg/L。4)池塘对虾白斑综合症占百分之20以内,可以使用碘类消毒剂配合五黄应激保肝液2亩/瓶进行水体消毒,严重时可以连泼两天。本病也可能是细菌（弧菌）或其它原因（如营养缺乏造成应激）引起。症状上略有区别：细菌性白斑的头胸甲剥离后，对着光线看，甲壳完好；病毒性白斑的甲壳剥离后，对着光线可见白点。虽然二者可能同时发生，但病灶很少重叠。处理方案)停料或减少投喂。2)多开动增氧机,保证水体溶解氧在5mg/L。3)池塘对虾白斑综合症占百分之20以内,可以使用茶麸20斤/亩进行浸泡后取浸泡液全塘泼洒。24小时后再使用钙中钙2亩/瓶配合三株噬菌王2亩/瓶。

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