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感冬不敢冻,派森诺双12暖心回馈



(文末有彩蛋)

基于PacBio三代测序平台的全长转录组测序(Iso-Seq),可直接获得mRNA的全长序列,可更为精准地解读mRNA的结构信息。

应用范围

获取mRNA全长序列

同源异构体分析

单碱基变异

可变剪接分析

检测融合基因

等位基因识别

派森诺优势

完善的样品提取检测方案,保障mRNA的完整性

根据具体物种,绘制转录本长度分布图,提供个性化的文库长度选择方案

派森诺拥有PacBioRSII及PacBioSequel单分子测序平台,提供一站式测序服务

专业的分析团队,提供个性化分析内容

文献解析

利用全长转录组测序技术揭示高粱转录组复杂性

1

研究背景

mRNA前体常会进行可变剪接(AS)和可变多聚腺苷酸化(APA),增加了转录组的多样性。高粱(Sorghumbicolor)的基因组测序于年完成,但转录组并没有得到较好的注释,还存在由短读长导致的低质量转录本注释错误,阻碍了AS和APA事件的研究。本文利用Pacbio全长转录组测序技术改进了高粱基因组的注释,该技术在AS和APA事件的研究中体现出巨大的优势。

2

实验方法

供试样本

高粱BTx品系的幼苗,实验分为干旱胁迫处理组和对照组,共2例样本。

文库构建

分段建库,以避免由于片段长度导致的系统偏差。

文库长度分布

1-2kb,2-6kb。

数据量

共测28个SMRTCell。

3

研究结果

实验共得到1.84MReadsofInsert,其中0.88M为全长ReadsofInsert。

可变剪接事件分析

本研究发现10,isoform经历了AS事件,远高于先前报道的1,个基因。证实高粱中存在的AS事件比之前的认知更为普遍。并发现在非生物胁迫下,isoform出现差异。文章对多isoform的基因进行RT-PCR验证,证实了结果的可靠性。

图一可变剪接事件分析

可变多聚腺苷酸化事件分析

APA事件是在编码区或3’-UTR区形成isoform,提高转录本的复杂性。由于单分子测序技术利用OligodT引物合成cDNA,poly(A)会出现在测序结果中,因此,单分子测序技术是研究APA的有力工具。本文发现在已表达的14,个基因中,11,个至少有1个poly(A)位点。

图二可变多聚腺苷酸化事件分析

4

参考文献

SalahE.Abdel-Ghanyetal.Asurveyofthesorghumtranscriptomeusingsingle-moleculelongreads.Nature







































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