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小白实验小实验之苏木精伊红染色实验
今天小编为大家带来的是个小小的实验,虽然小,而且很多时候采用自动染色机能帮你实现,但是,原理及试剂的配置仍然是学习的要点哦,小白们还是要搞搞清楚哒~~~~所以,这主要是一篇戳原理的推文,嘿嘿原理HE(hematoxylin-eosinstaining)染色是较为成熟的实验技术,应用广泛,是组织学及病理学检查的基本方法。针对的是石蜡切片的样本(注意哦,有的小伙伴会用冰冻切片的片子去做,这是不好的!因为冰冻切片一般较厚,会使得染色结果不能够判断,太厚了啦!!!)苏木精染料呈碱性,能够把细胞核内染色质与胞浆内的核酸(称为嗜碱性部分)染为蓝紫色;而伊红为酸性的染料,能将嗜酸性部分比如细胞质核细胞外基质中的成分染为红色。细胞核内DNA很容易与苏木精以离子键结合,使得细胞核被染为蓝色。伊红在水中电离后带阴离子,可以与蛋白质结合,使得比如细胞浆、红细胞、结缔组织等染红色。通过苏木精染色处理后,再利用伊红染胞浆,从而使得各组分呈现出鲜明的对比色,从而可以明确的看出各种组织的病变。步骤1.试剂配置:哈瑞(Harris)苏木素液A液:苏木素1g无水酒精10mlB液:硫酸铝钾20g纯净水ml配制方法:称取KAlSO4·12H2O36.72g及苏木素1g,分别溶解后混合,加热煮沸后,徐徐加入红色氧化汞0.5g,此时有大量气泡产生(故容器宜大,以防液体溢出),然后将染液迅速冷却,冷却后过滤。每ml加入冰醋酸6ml,并加入甘油(丙三醇)10ml。混匀后即可使用。2.染色步骤:1)取组织的石蜡切片,二甲苯脱蜡,经乙醇逐步脱水:二甲苯(I)5min;二甲苯(II)5min;%乙醇2min;95%的乙醇1min;80%乙醇1min;75%乙醇1min;蒸馏水洗2min(各两次,然后把水吸干)。2)苏木素染色5min,自来水冲洗(吸干水)。3)盐酸乙醇分化30s(提插数下)。4)自来水浸泡15min(吸干水)。5)置伊红液2-3min。6)常规脱水,透明,封片:95%乙醇(I)30s;95%乙醇(Ⅱ)30s;%乙醇(I)30s;%乙醇(Ⅱ)1min;二甲苯15min;中性树脂封片。好哒,播报到此,大实验要学,小实验也要做,大家都棒棒哒
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