您的当前位置:寡趣症 > 饮食调养 > PCR引物设计的黄金法则
PCR引物设计的黄金法则
1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因,通过序列分析软件(比如DNAman)比对(Alignment),各基因相同的序列就是该基因的保守区。2.引物长度一般在15~30碱基之间。引物长度(primerlength)常用的是18-27bp,但不应大于38,因为过长会导致其延伸温度大于74℃,不适于TaqDNA聚合酶进行反应。3.引物GC含量在40%~60%之间,Tm值最好接近72℃。GC含量(白癜风山东哪家医院好看白癜风到中科白癜风医院